AbMole丨LDC7559:GSDMD抑制剂,通过调控NETosis与PANoptosis在炎症及神经损伤研究中的应用
LDC7559AbMoleM13554是一种泛凋亡PANoptosis相关分子消皮素 D (GSDMD) 的抑制剂最初通过从化合物库中筛选抑制佛波酯Phorbol 12-myristate 13-acetatePMA诱导的中性粒细胞胞外杀菌网络NETosis而被发现它在PMA诱导的NETosis中IC50约为5.6 μM在胆固醇晶体诱导的NETosis中IC50约为300 nM[1]。早期研究认为LDC7559CAS No.16561-29-8通过直接结合消皮素DGSDMD并抑制其N端结构域的细胞膜孔洞形成活性从而阻断NET释放和IL-1β分泌。近期研究发现LDC7559还能通过作为糖酵解酶磷酸果糖激酶-1肝型PFKL的强效激动剂发挥作用其激活PFKL的EC50为66.04 ± 18.93 nM进而抑制NOX2依赖的氧化爆发和NETosis[1]。在THP-1细胞和原代神经元小胶质细胞共培养体系中5 μM、25 μM和50 μM的LDC7559可剂量依赖性地改善细胞活力并抑制IL-1β、IL-6和IL-18等促炎因子的释放[2]。在动物模型中成年雄性Sprague-Dawley大鼠体重230-280 g建立蛛网膜下腔出血SAH模型后于造模后2小时开始腹腔注射LDC755910 mg/kg、20 mg/kg或30 mg/kg每日一次其中20 mg/kg被确定为该实验的最佳剂量可显著改善神经功能缺损评分、减轻脑水肿、抑制小胶质细胞激活及GSDMD介导的神经元发生泛凋亡且该保护作用可被NLRP3激活剂-尼日利亚菌素Nigericin所逆转[2]。研究显示LDC7559AbMoleM13554还具有神经保护活性可以在创伤性脑损伤小鼠模型中抑制GSDMD依赖性小胶质细胞的焦亡其最佳剂量为10 mg/kg[3]。类似地LDC7559以10 mg/kg的剂量可以有效抑制GSDMD介导的小鼠肺损伤[4]。参考文献及鸣谢[1] Dai, Z.; Liu, W. C.; Chen, X. Y.; et al. Gasdermin D-mediated pyroptosis: mechanisms, diseases, and inhibitors. Frontiers in immunology2023, 14, 1178662.[2] Cai, W.; Wu, Z.; Lai, J.; et al. LDC7559 inhibits microglial activation and GSDMD-dependent pyroptosis after subarachnoid hemorrhage. Frontiers in immunology2023, 14, 1117310.[3] Yu, E.; Zhang, E.; Lv, X.; et al. LDC7559 exerts neuroprotective effects by inhibiting GSDMD-dependent pyroptosis of microglia in mice with traumatic brain injury.2023, 40 (7-8), 742-757.[4] Vats, R. PageCirculating Neutrophil Extracellular Traps Promote Gasdermin-D Dependent Lung Injury in Sickle Cell Disease. University of Pittsburgh, 2021.细胞实验参考细胞系Neutrophils方法Cells were pretreated with DMSO vehicle, 0.5 μM NA-11, 100 μM apocynin, 0.5 μM and 5 μM PALP, or 0.5 μM and 5 μM LDC7559 for 30 min, and then stimulated with 50 nM PMA, 1 μM f-MLP, 5 μg/mL cholesterol crystals, 10 μg/mL LPS, 25 μM nigericin, or 25 μM calcymicin for 3 h浓度5 μM处理时间30 min参考文献Cell. 2021 Aug 19;184(17):4480-4494.e15.* 上述方法来自公开文献仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同请参考其他文献。动物实验参考动物模型Humanized mice with sickle cell disease配制Saline剂量10 mg/kg给药处理Vaso-occlusion参考文献Blood. 2022 Sep 1;140(9):1020-1037.* 上述方法来自公开文献仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同请参考其他文献。体内实验的工作液建议现用现配当天使用如在配制过程中出现沉淀、析出现象可以通过超声和或加热的方式助溶。切勿一次性将产品全部溶解。建议制定动物给药及实验方案时尽量参考已发表的相关实验文献溶剂种类及配比众多简单地溶解目的化合物并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用。

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